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色譜柱清洗和再生的四個步驟,您做對了嗎?

柱清洗與再生的推薦步驟:

壓力升高,色譜柱峰形發(fā)生變化如出現嚴重拖尾、肩峰甚至峰分岔,分離度降低,這些都強烈提示色譜柱受到污染??刹捎靡韵虏襟E處理:

1.如系統(tǒng)接有在線過濾器和保護柱,首先排查在線過濾器與保護柱,進行更新替換。日常操作中,當壓力升高10%或柱效降低10%時,就應考慮更換在線過濾器和/或保護柱。

2.使用高比例的有機溶劑進行沖洗(請注意避免鹽析出,通??墒褂锰荻壬叻?,然后維持在高比例甚至100%有機溶劑條件下)。此操作通??上慈ゴ蟛糠治廴疚?。

3.如有機溶劑清洗不能解決問題,可采用如下方法進行色譜柱的清洗和再生。根據樣品性質以及你所了解的污染物性質選擇清洗方法,用20倍柱體積(即,對于6x250mm柱,相當于80mL)的HPLC級溶劑清洗色譜柱,將流動相溫度升至35-55?C可提高清洗效率。

4.可以考慮對色譜柱進行倒沖,特別是當問題表現為壓力急劇升高,提示有顆粒型物質直接堵塞于色譜柱入口端篩板處時。操作時,將色譜柱倒接,并與檢測器斷開。使用低流速2ml/min,進行過夜沖洗,并封堵檢測器入口及出口端以免溶劑揮干產生氣泡。甚或,將色譜柱小心的打開,直接更換柱入口端篩板。

備注:以上沖洗和再生程序為反沖!

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